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DART-MS 快速分析返幼激素Ⅲ及其引物

返幼激素Ⅲ（JH Ⅲ）是一类保持昆虫幼虫形状和促进成虫卵巢发育的激素。通常的分析该激素方法为NMR、GC-MS、IR，实际上，均未得到良好的实验结果。本文采用原位电离技术DART-TOF有效的解决了这一问题。该激素其引物化学组成为双三醇，麝油酸，甲基法尼酯。实验采用DART结合CID区分返幼激素Ⅲ的同分异构体。30s之内快速完成样品的分析。该方法有效的完成该激素中挥发性以及中等挥发性的化合物的分析检测。

实验结果

1、仪器参数优化
实验采用Dip管直接进样，由图1可知，[M-H2O+H]+为205.19灵敏度最高，也有分子离子峰。由于Penning过程大部分产生分子离子峰，谱图干净，有利于谱图解析。并且优化了DART离子源参数，比如温度、电压、气体流速等（图2）。




2、分析方法
该方法具有较低的检出限，由图3可知，双三醇在浓度为0.1 pmol/uL时，信噪比S/N=12；FA在浓度为4 pmol/uL时，信噪比S/N=16.5；MF在浓度为4 pmol/uL时，信噪比S/N=18.4；JH Ⅲ 在浓度为1 pmol/uL时，信噪比S/N=24.4。



3、同分异构体
实验发现双三醇具有同分异构，实验采用NIST谱库收索发现是一种脂肪醇类化合物。由图4可知，两种化合物均有相同的分子离子峰，经过CID裂解之后，发现子离子有较大差异；并且在不同的电压下，子离子的质谱响应强度有较明显的差异。



结论

1、优化DART-TOF参数，建立了快速分析昆虫萜类化合物的分析方法；
2、进一步阐述了Penning机理，，主要是以分子离子峰存在，谱图易于分析；
3、该方法具有较低的检出限，满足分析的要求；
4、 有效的区分目标物的同分异构体，避免的产生阳性结果。

链接：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20936260
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